MUHWA 소변 침전물 계수 챔버

I. 그리드 선택
소변 침전물 계수에는 일반적으로 네 모서리에 큰 격자판 네 개 또는 중앙에 큰 격자판 한 개가 사용됩니다(세포/원주체의 수에 따라 조정: 세포 수가 많을 경우 네 모서리 격자판 네 개, 세포 수가 적을 경우 중앙에 큰 격자판 한 개).

검체 준비 및 사전 계수 처리
표본 수집:
일반적으로 아침에 채취한 신선한 소변(농도가 높고 양성률이 높음) 또는 무작위 소변을 10mL의 소변을 원심분리 튜브에 담아 채취합니다.

원심분리 농축: 표준 작업 절차에 따라 1500rpm으로 5분간 원심분리합니다.

상층액 버리기: 상층액은 조심스럽게 버리고, 바닥의 침전물 0.2mL만 남겨둡니다(50배 농축, 농축 계수 = 원래 소변량 / 침전물량 = 10/0.2 = 50).

침전물 재현탁: 원심분리 튜브를 부드럽게 흔들어 침전물이 고르게 분산되고 세포 응집이 방지되도록 합니다.

계수 절차: 시료 첨가: 마이크로피펫을 사용하여 혼합된 소변 침전물을 흡입하여 계수실의 커버슬립 가장자리에 첨가합니다(모세관 현상을 이용하여 계수실을 채웁니다). 이때 기포가 들어가지 않도록 주의합니다(기포가 들어가면 계수 영역의 부피가 부정확해집니다).

침전: 계수실을 스테이지 위에 놓고 1~2분간 그대로 두어 형성된 세포들이 계수실 바닥으로 가라앉도록 합니다. 이렇게 하면 계수 중 부유 세포로 인한 오류를 방지할 수 있습니다.

현미경 관찰: 저배율(10배) 현미경을 사용하여 계수실의 위치를 찾은 다음, 고배율(40배) 현미경을 사용하여 계수합니다.

계수 원칙: 중복이나 누락을 방지하기 위해 "위쪽만 세고 아래쪽은 세지 않으며, 왼쪽만 세고 오른쪽은 세지 않는" 원칙(인접한 변과 모서리 부분의 세포만 계수)을 따르십시오. 계수 영역 선택: 적혈구, 백혈구 등이 많은 성분의 경우, 네 모서리 사각형 내의 모든 목표 성분을 계수하십시오.

주조 횟수가 적은 부품 등의 경우: 계수실의 9개 큰 사각형 안에 있는 모든 목표 부품을 계수하십시오.

핵심 계산 방법: 소변 침전물 계수

이 계산은 "계산 영역 내 실제 양"을 "소변 내 성분의 원래 농도"로 변환합니다. 이 공식에는 계수 영역의 부피와 시료 농축 계수를 고려해야 합니다.

일반 계산 공식:

구체적인 계산 예시 (예시로 모서리 셀 4개를 세는 경우):


1. 매개변수 결정:

계수 영역: 큰 세포 4개, 각 큰 세포의 부피는 0.1μL이므로, 큰 세포 4개의 총 부피는 4 × 0.1 = 0.4μL입니다.

농축 계수: 소변 10mL를 원심분리하면 0.2mL의 침전물이 남으므로 농축 계수는 10/0.2 = 50입니다.

실제 계수: 네 모서리 세포에서 총 80개의 백혈구가 계수되었다고 가정합니다.


세포 수 계산이 더 간단한 경우 (큰 세포 9개 계산)

만약 9개의 큰 세포를 세는 경우(예: 원기물 계수), "계산 영역의 총 부피 = 9 × 0.1 = 0.9μL"이므로 다른 매개변수는 변경되지 않고 해당 공식을 적용할 수 있습니다.

9개의 계수 영역(각 영역의 액체 부피는 0.1 μL이며, 각 영역의 크기는 3 mm x 3 mm이고 깊이는 100 μm임)이 있습니다. 격자선의 너비는 15 μm(±1 μm)입니다.